Myostatin Levels and the Risk of Myopenia and Rheumatoid Cachexia in Women with Rheumatoid Arthritis.

Background: Myostatin is a regulator of muscle size. To date, there have been no published studies focusing on the relation between myostin levels and myopenia in rheumatoid arthritis (RA). Objective: Evaluate the value of serum myostatin as a biomarker of cachexia and low skeletal muscle mass (LSMM) in RA patients, along with whether high serum myostatin is associated to these conditions after adjusting for potential confounders. Methods: This cross-sectional study included 161 female RA patients and 72 female controls. In the RA group, we assessed several potential risk factors for LSMM and rheumatoid cachexia. Dual-energy X-ray absorptiometry was used to quantify the skeletal muscle mass index (SMMI) (considering LSMM ≤ 5.5 kg/m2) and the presence of rheumatoid cachexia (a fat-free mass index ≤ 10 percentile and fat mass index ≥ 25 percentile of the reference population). Serum myostatin concentrations were determined by ELISA. To identify a cut-off for high serum myostatin levels, we performed ROC curve analysis. Multivariable logistic regression analysis was used to identify the risk factors for LSMM and rheumatoid cachexia. The risk was expressed as odds ratios (ORs) and their 95% confidence intervals (95% CIs). Results: Compared to the controls, the RA group had a higher proportion of LSMM and exhibited high serum myostatin levels (p < 0.001). ROC curve analysis showed that a myostatin level ≥ 17 ng/mL was the most efficient cut-off for identifying rheumatoid cachexia (sensitivity: 53%, specificity: 71%) and LSMM (sensitivity: 43%, specificity: 77%). In the multivariable logistic regression, RA with high myostatin levels (≥17 ng/mL) was found to increase the risk of cachexia (OR = 2.79, 95% CI: 1.24-6.29; p = 0.01) and LSMM (OR = 3.04, 95% CI: 1.17-7.89; p = 0.02). Conclusions: High serum myostatin levels increase the risk of LSMM and rheumatoid cachexia. We propose that high myostatin levels are useful biomarkers for the identification of patients in risk of rheumatoid cachexia and myopenia.

Therapeutic response to leflunomide in combo therapy and monotherapy is associated to serum teriflunomide (A77 1726) levels.

There is a significant rate of therapeutic failure in rheumatoid arthritis (RA) patients treated with leflunomide (LEF). This study investigates the utility values of teriflunomide levels (A77 1726) in identifying RA patients who remained with moderate or severe disease activity after the treatment with LEF. In this cross-sectional study, we compared: (a) RA patients who achieved a DAS28-ESR ≤ 3.2, and (b) RA patients who maintained a DAS28-ESR > 3.2 after treatment. ROC curves determined the cut-off of A77 1726 with the better performance to identify patients achieving a DAS28-ESR ≤ 3.2. Of the 115 patients treated with LEF, 69 (60%) remained with moderate/severe disease activity and 46 (40%) achieved low disease activity/remission. Higher A77 1726 levels showed a negative correlation with DAS28-ESR (r = - 0.42, p < 0.001) and other parameters of disease activity. We obtained the following utility values with the cut-off of A77 1726 > 10 µg/mL to identify RA patients who achieved a DAS28-ESR ≤ 3.2: sensitivity of 91.31%; specificity of 73.91%; positive predictive value of 70.00%; and negative predictive value of 92.73%. Serum A77 1726 discriminated between RA patients who remained with moderate/severe disease activity despite the treatment with LEF both as monotherapy and LEF as combo therapy.

Serum irisin concentrations and osteoporotic vertebral fractures in women with rheumatoid arthritis: A cross-sectional study.

ABSTRACT: Irisin stimulates osteoblast differentiation increasing bone mass a decreasing in irisin levels might contribute to osteoporotic fractures in inflammatory diseases. To date, there is controverted whether irisin levels are associated with osteoporotic fractures in rheumatoid arthritis (RA). Therefore, we evaluate the association of serum irisin with osteoporotic Vertebral Fractures (VFs) in women with RA.A total of 148 women with RA was included in the study.Clinical characteristics and risk factors of VFs was evaluated. For measurement of bone mineral density we included the assessment of lumbar spine (AP L1-L4) and Femoral Neck by dual-energy X-ray absorptiometry (DXA). VFs were evaluated by lateral vertebral assessment (LVA) of the dorsal and lumbar regions using X-ray and digital vertebral morphometry by DXA, using the Genant scale. Serum irisin levels were measured by ELISA. A reference group of 97 women with non-rheumatic diseases were included to compare irisin levels.RA patients had a median age of 59 years and 41% had osteoporosis. Seventy three (49%) had VFs. Lower irisin levels were observed in RA patients compared to controls (94 ±â€Š74 vs 135 ±â€Š103, P < .001). Irisin concentrations were lower in RA + VFs than RA non-VFs (74 ±â€Š42 vs 113 ±â€Š92 ng/mL, P = .001). In the multivariable logistic regression analysis the low 50 percentile irisin levels < 73 ng/mL (OR:3.1, 95% CI:1.55-6.2, P = .001), and disease duration of RA (OR:1.04, 95% CI:1.001-1.08, P = .04) were associated with an increase in the risk of VFs.A decrease of irisin levels is associated to VFs in RA. These results are valuable to consider that RA patients with low levels of irisin are in a potential risk of VFs.

Assessment of serum macrophage migration inhibitory factor (MIF), adiponectin, and other adipokines as potential markers of proteinuria and renal dysfunction in lupus nephritis: a cross-sectional study.

BACKGROUND: To date, the association of serum macrophage migration inhibitory factor (MIF) and serum adipokines with lupus nephritis is controversial. OBJECTIVE: To assess the utility of serum MIF, leptin, adiponectin and resistin levels as markers of proteinuria and renal dysfunction in lupus nephritis. METHODS: Cross-sectional study including 196 systemic lupus erythematosus (SLE) patients and 52 healthy controls (HCs). Disease activity was assessed by Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index (SLEDAI). Renal SLE involvement was investigated by renal-SLEDAI. MIF, adiponectin, leptin and resistin levels were quantified by ELISA. We assessed the correlations of quantitative variables by Spearman correlation (rs). Multivariable linear regression adjusted the variables associated with the severity of proteinuria. RESULTS: SLE patients had higher MIF (p = 0.02) and adiponectin (p < 0.001) than HCs. Patients with renal SLE involvement (n = 43) had higher adiponectin (19.0 vs 13.3 µg/mL, p = 0.002) and resistin (10.7 vs 8.9 ng/mL, p = 0.01) than patients with non-renal SLE (n = 153). Proteinuria correlated with high adiponectin (r s  = 0.19, p < 0.009) and resistin (r s  = 0.26, p < 0.001). MIF (r s  = 0.27, p = 0.04). Resistin correlated with increased creatinine (r s  = 0.18, p = 0.02). High renal-SLEDAI correlated with adiponectin (r s  = 0.21, p = 0.004). Multiple linear regression showed that elevated adiponectin (p = 0.02), younger age (p = 0.04) and low MIF (p = 0.02) were associated with the severity of proteinuria. Low MIF and high adiponectin levels interacted to explain the association with the severity of proteinuria (R2 = 0.41). CONCLUSIONS: High adiponectin combined with low MIF concentrations int+eract to explain the severity of proteinuria in renal SLE. These findings highlight the relevance of adiponectin, resistin and MIF as markers of LN.

Terapia celular para el tratamiento de úlceras crónicas / Cell therapy in chronic ulcers treatment

INTRODUCCIÓN: las úlceras por presión son producto de una necrosis isquémica en la piel y tejido subcutáneo, se presentan en pacientes inmovilizados por etiología diversa, y en estadios avanzados incrementan la mortalidad. La terapia celular con Células Madre Somáticas, que se diferencian y proliferan a células maduras funcionalmente normales, tiene la finalidad de reparar la función de tejidos lesionados. OBJETIVO: Evidenciar la eficacia de las Células Madre Somáticas de médula ósea en la reparación de úlceras crónicas por presión, como una posibilidad terapéutica en los tratamientos convencionales no exitosos. MÉTODO: Se estudió 4 pacientes con úlceras crónicas por presión en estadios avanzados y refractarias a tratamiento convencional. Se obtuvo Células Madre Somáticas de la médula ósea del esternón, y se procedió al sembrado de las mismas una vez por semana. Resultados.- Las Células Madre Somáticas sembradas en las úlceras crónicas se diferenciaron en tejido muscular, conjuntivo, subcutáneo y epitelial en un periodo comprendido entre 30 a 69 días. CONCLUSIÓN: la terapia celular con Células Madre Somáticas de médula ósea se constituye en una posibilidad terapéutica en úlceras crónicas de estadios avanzados y refractarias a tratamiento convencional.

INTRODUCTION: chronic pressure ulcers result from an ischemic necrosis of the skin and subcutaneous tissue. This type of ulcers occurs in patients physically restrained by different etiology and in advanced stages increase mortality. Cell therapy allows to regenerate the function of injured tissues by using somatic stem cells that differentiate and proliferate into mature cells on order to repair injured tissues. OBJECTIVE: to demonstrate the effectiveness ofusing Somatic Stem Cells obtained from bone marrow in chronic pressure ulcers treatment, as a likely therapeutic option to unsuccessful conventional treatments. METHOD: it was studied 4 patients with chronic pressure ulcers in advanced stages and refractory to conventional treatment. It was obtained Somatic Stem Cells from the bone marrow and followed a process of seeding on a weekly basis. RESULTS: somatic Stem Cells seeded in chronic pressure ulcers differentiated into muscle, connective, epithelial and subcutaneous tissues. The repair of injured tissues lasted between 30 to 69 days. CONCLUSION: cell therapy by using Somatic Stem Cells from bone marrow constitutes a therapeutic option in chronic ulcers of advanced stages and refractory to conventional treatment.

Filtro de agua en la preparación de quimioterapia para optimizar la bioseguridad / Water filter in the preparation of chemotherapy to optimize biosafety

Los quimioterápicos son elaborados a una presión barométrica correspondiente a nivel del mar. En ciudades de altitud elevada como La Paz (3600 msnm), la presión al interior de los frascos es superior, esto constituye un riesgo de salida del medicamento. Objetivo Describir la utilidad de los filtros de agua durante la preparación de quimioterápicos para evitar eventos adversos severos en el personal de salud y medio ambiente. Material y Métodos Se adquirió quimioterápicos, Metotrexate, Adriamicina y Endoxan, para ser sometidos a pruebas de experimentación. Se cuantificó el volumen de aire expulsado desde el interior del frasco hacia la jeringa. Se evaluó la utilidad del filtro de agua, 5 ml de agua destilada en jeringas de 20 ml. Las longitudes de onda de máxima absorción de los quimioterápicos fueron obtenidos de un barrido espectral. Se determinó la concentración de cada quimioterápico en los filtros de agua a través de un espectrofotómetro Shimadzu UV1800. Resultados Los volúmenes de aire fueron distintos en cada citostático, el volumen varió de acuerdo a marca de fabricación. Las lecturas realizadas de los filtros de agua evidenciaron una concentración de Adriamicina de 33.8 ug/ml para marca FILAXIS y 32.8 ug/ml para LKM, Metotrexato LKM 7.6 ug/ml, y la ciclofosfamida 16.6 ug/ml para LKM y 14.0 ug/ml para Baxter. Conclusión La propiedad hidrosoluble de los quimioterápicos permite un uso factible de filtros de agua, reteniendo citostáticos en un porcentaje desconocido pero importante. La utilización de filtros de agua constituye en una herramienta significativa para optimizar la bioseguridad.

Chemotherapeutic drugs are made at a barometric pressure corresponding to a sea level. In cities ofhigh altitude such as La Paz (3600 m.a.s.l.), the pressure inside the drug bottle is higher and this represents a risk of leakage from drug. Objective Describe the usefulness of distilled water as water filter in the preparation of chemotherapy to avoid severe adverse events in health staffand the environment. Material and methods Chemotherapeutic drugs such as methotrexate, adriamycin and endoxan were tested. The volume of air expelledfrom inside the bottle to the syringe was measured. It was evaluated the utility of using 5 ml of distilled water in 20-mL syringes as water filter. By means of a spectral scanning it was obtained the wavelengths of maximum absorption from the chemotherapeutics. The concentration of each chemotherapeutic drug inside water filters were determined by using a Shimadzu UV1800 spectrophotometer. Results Air volumes were differentin each chemotherapeutic drug, volume varied according to manufacturing brand. Water filters reading showed a concentration of Adriamycin 33.8 ug/ml for Filaxis brand and 32.8 ug/ml for LKM, Methotrexate LKM showed 7.6 ug/ml, and cyclophosphamide 16.6 ug/ ml for LKM and 14.0 ug/ml for Baxter. Conclusion The water-soluble property of chemotherapeutic drugs allows a feasible use of distilled water as water filter which retains cytostatics in an unknown but significant percentage. The use of distilled water as water filter is a significant tool to optimize biosafety.

Leucemia bifenotípica aguda B/T: presentación de caso clínico / Biphenotypic acute leukemia: case report

La leucemia bifenotípica aguda (LBA) es una enfermedad poco frecuente que comprende alrededor de 2 al 5% del total de casos de todas las leucemias. La LBA se caracteriza por la expresión asociada de 2 o más marcadores de diferentes líneas celulares en la población celular de blastos. Al respecto, la clasificación de neoplasias hematológicas y linfoides realizada por la OMS el 2008, incorporó los criterios de EGIL para el diagnóstico de este tipo de leucemia. La leucemia bifenotípica, que muestra fenotipos B y T es extremadamente rara y de mal pronóstico por lo que existe poca información respecto al manejo clínico de estos pacientes. Actualmente no existe un tratamiento estándar para estos casos, ya que no se pueden realizar estudios clínicos aleatorizados debido a la baja incidencia de la LBA. Sin embargo, el uso del protocolo Hiper CVAD (hiperfraccionamiento de ciclofosfamida, vincristina, adriamicina y dexametasona; y altas dosis de citarabina y metotrexato) ha logrado un 78% de remisión completa y una media de duración de sobrevivencia de 27 meses. Recientemente la incorporación de inhibidores de la tirosina kinasa (imatinib, nilotinib o dasatinib) en combinación con el protocolo hiperCVAD ha mejorado la tasa de remisión completa durante la inducción. En este trabajo reportamos el caso de un paciente diagnosticado con leucemia bifenotípica B/T cuya población clonal presentó positividad para marcadores linfoides, obteniéndose una puntuación de 6,5 para el linaje B y 4,5 para el linaje T según los criterios de EGIL.

Biphenotypic acute leukemia (BAL) is an uncommon disease comprising approximately from 2 to 5% of all leukemia cases. BAL is characterized by the associated expression of two or more markers of different cell lines in a single blasts population. In this regard, 2008 WHO Classification of Tumors of Hematopoietic and Lymphoid Tissues included EGIL score system for diagnosing this type of leukemia. The biphenotypic leukemia that expresses B and T phenotypes is extremely unusual and it has poor prognosis. Due to low incidence of BAL, it is not possible to conduct randomized trials and consequently little is known about the clinical management of this kind of patients. Currently, there is no a standard treatment for these cases. However, the use of Hyper-CVAD regimen (hyperfractionated of cyclophosphamide, vincristine, adriamycin, and dexamethasone; and high dose of methotrexate and cytarabine) has achieved a 78% of complete remission with an average survival of 27 months; and the incorporation of tyrosine kinase inhibitors (imatinib, nilotinib or dasatinib) has improved the remission rate during induction. We report the case of a patient whose clones gave positive for B and T lymphoid markers and according to EGIL score system, it was obtained 6.5 for B lineage and 4.5 for Tlineage

Eritrocitosis patológica de altura: caracterización biológica, diagnóstico y tratamiento / High alitude patthological erythrocytosis: biological characterization, diagnosis and treatmnnt

Introducción. Los pobladores de grandes alturas se adaptaron de modo diferentes, siguiendo rutas distintas con el mismo objetivo de suministro de oxígeno y la supervivencia. En el presente trabajo se caracteriza la Eritrocitosis Patológica de Altura y se demuestra la eficacia de la atorvastatina en el tratamiento. Material y métodos. Se estudiaron: Sujetos varones como Controles Normales (CN), y pacientes con Eritrocitosis Patológica de Altura (EPA), Eritrocitosis Secundaria (ES) y Policitemia Vera (PV). Se realizaron estudios de laboratorio y de biología molecular. Se realizó estudio clínico de fase 2 con atorvastatina. Resultados. La EPA presenta: eritropoyetina normal, apoptosis retardada de progenitores eritroides, crecimiento autónomo de BFU-E e hipersensibilidad a la eritropoyetina. La atorvastatina como tratamiento en pacientes con EPA disminuye la concentración de hemoglobina y remite la sintomatología de la hiperviscosidad sanguínea. Conclusiones. La EPA tiene características propias que la distinguen de otras eritrocitosis patológicas y la atorvastatina se constituye en tratamiento eficaz.

Introduction. The residents of high altitude get use to it in different ways, following the same purpose in order to supply oxygen and survival. In the present paper, we characterize the High Altitude Pathological Erythrocytosis disease and demonstrate the effectiveness of atorvastatin in its treatment. Material and methods. We studied male subjects as normal controls (CN), and patients with High Altitude Pathological Erythrocytosis (EPA), Secondary Erythrocytosis (ES) and Polycythemia Vera (PV). Laboratory and molecular biology studies were conducted. We developed in the study of 2nd phase with atorvastatin. Results. The EPA presents: normal erythropoietin, delayed erythroid progenitors apoptosis, autonomous growth of BFU-E and hypersensitivity to erythropoietin. The atorvastatin in patient with EPA, decreased hemoglobin concentration and eliminates the symptomatology of blood hyperviscosity Conclusions. The EPA has characteristics that distinguish it from other pathologic erythrocytosis and atorvastatin becomes an effective treatment.

Mecanismo molecllar de las estatinas en el tratamiento de la eritrocitosis patoológica de altura / Molecular mechanism of statins in the treatment of high altitude pathological erythroyytosis

Introducción La Eritrocitosis Patológica de Altura es la manifestación hematológica de la Enfermedad Crónica de Altura, por adaptación inadecuada a grandes alturas de genes reguladores de la eritropoyesis. Las estatinas son inhibidores de la vía del mevalonato involucrado en la regulación de la eritropoyesis. El presente trabajo describe los mecanismos moleculares de la inhibición de la eritropoyesis en pacientes con eritrocitosis patológicas. Material y métodos Se estudiaron 35 pacientes con eritrocitosis patológicas con radicatorias en las ciudades de La Paz y El Alto (3600 y 4000 msnm respectivamente). Se realizaron Cultivo de células progenitoras hematopoyéticas y Western Blot. Resultados Statins induce apoptosis of erythroid progenitors in the cell culture medium. Without the supplement of simvastatin the apoptosis was 12.3% and With simvastatin the apoptosis was 38.4% (p = 0.001). Furthermore statins inhibit the proliferation and differentiation of erythroid progenitors. Conclusiones Los mecanismos moleculares involucrados en la inhibición de la eritropoyesis son: a) Bloqueo de la isoprenilación de Rho y Ras, b) Inhibición de la fosforilación de Jak-2 y Stat-5, c) inhibición de la glicosilación del EpoR, d) Disminución de colesterol en microdominios de la membrana celular (raft lipid), e) Inducción de apoptosis a través de BCLxL y caspasa 9.

Introduction The High altitude Pathological Erythrocytosis is the chronic mountain sickness hematologic manifestation by inadequate adaptation to high altitudes of genes regulating erythropoiesis. Statins are inhibitors of the mevalonate pathway involved in the regulation of erythropoiesis. This paper describes the molecular mechanisms of erythropoiesis inhibitionin patients with pathological erythrocytosis. Material and methods We studied 35 patients with pathological erythrocytosis from La Paz and El Alto city (3600 and 4000 masl respectively). Were performed hematopoietic progenitor cell culture and Western blotting. Results Statins induce apoptosis in liquid culture medium. without simvastatin erythroid progenitors from apoptosis presentarón and 12.3% in the group supplemented with simvastatin 38.4% apoptosis (p = 0.001), statins also inhibit the proliferation and differentiation of erythroid progenitors, and inhibit transcription of STAT-5. Conclusions The molecular mechanisms involved in the erythropoiesis inhibition are: a) Inhibition of Ras and Rho isoprenylation, b) Inhibition of Jak-2 and Stat-5 phosphorylation, c) inhibition of EpoR glycosylation, d) Statins reduce lipid rafts cholesterol and reduce JAK2 localization to lipid rafts, e) Induction of apoptosis through caspase 9 and BclxL.

Epidemiología de las leucemias en Bolivia: 1473 casos enero 1999 a mayo de 2012 / Epidemiology of leukemias in Bolivia: 1473 cases from January 1999 to May 2012

Introducción La leucemia es la neoplasia hematológica más frecuente, su incidencia se ha incrementado en diferentes regiones del mundo. Bolivia está experimentando el fenómeno de la "transición epidemiológica", de una alta incidencia de enfermedades infecciosas a una creciente prevalencia de las enfermedades oncológicas. El presente trabajo describe las características epidemiológicas de las leucemias en Bolivia. Métodos Se analizaron los datos epidemiológicos y resultados de diagnósticos de 1473 muestras de pacientes con leucemia procedentes de diferentes Centros Oncohematológicos de Bolivia, en fechas comprendidas entre enero de 1999 a mayo de 2012. Todas las muestras fueron evaluadas con estudio morfológico e inmunofenotípico. Los diagnósticos de Leucemia Mieloide Crónica y Leucemia Mieloide Aguda M3 fueron confirmados con estudios biomoleculares. Resultados Los pacientes fueron divididos en dos grupos: Se consideraron pacientes pediátricos a menores de 18 años y pacientes adultos a mayores de 18 años y un día. De los 1473 pacientes con leucemia, 896 (61%) fueron niños y 577 (39%) fueron adultos. De los pacientes pediátricos 47% fueron niñas y 53% fueron niños. La distribución según diagnóstico fue la siguiente: Leucemia Linfoblástica Aguda 706 (79%), Leucemia Mieloblástica Aguda 172 (19%) y Leucemia Mieloide Crónica 18 (2%). De los pacientes adultos 43% fueron mujeres y 57% fueron varones. La distribución según diagnóstico fue la siguiente: Leucemia Linfoblástica Aguda 188 (33%), Leucemia Mieloblástica Aguda 176 (30%), Leucemia Linfocítica Crónica 31 (5%) y Leucemia Mieloide Crónica 182 (32%). Conclusión Los resultados obtenidos presentaron características epidemiológicas propias para Bolivia, probablemente por la estructura multiétnica, pluricultural y la expectativa de vida menor en relación a otros países.

Introduction Leukemia is the most common hematological neoplasm, their incidence was increased in different regions of the world. Bolivia is experiencing the phenomenon of "epidemiological transition", from a high incidence of infectious diseases to an increasing prevalence of oncological diseases. This paper describes the epidemiological features of leukemia in Bolivia. Methods Patients were grouped into two groups: The pediatric patients under 18 years and adult patients over 18 years and one day. We studied the diagnostic results and epidemiological data of 1473 samples of leukemia patients from different centers for oncohematologic disease of Bolivia, in dates between January 1999 to May 2012. All the samples were tested with morphologic and immunophenotypical studies. The diagnoses of Chronic Myeloid Leukemia and Acute Promyelocitic Leukemia (AML-M3) were confirmed with biomolecular studies. Results Of 1473 patients with leukemia, 896 (61%) were pediatric patients and 577 (39%) were adults patients. In pediatric patients were 47% girls and 53% were children. The distribution according to the diagnosis was the following: acute lymphoblastic leukemia 706 (79%), acute myeloblastic leukemia 172 (19%) and chronic myeloid leukemia 18 (2%). In adult patients 43% were women and 57% were male. The Distribution according to the diagnosis was the following: acute lymphoblastic leukemia 188 (33%), acute myeloblastic leukemia 176 (30%), chronic lymphocytic leukemia 31 (5%) and chronic myeloid leukemia 182 (32%). Conclusion The results obtained showed different epidemiological characteristics, probably due to the structure multiethnic, multicultural and lower life expectancy in relation to other countries.

UMSAgen, método para la extracción simultánea de RNA y DNA para diagnóstico molecular / UMSAgen, the method for simultaneous extraction RNA and DNA for molecular diagnostics

INTRODUCCIÓNEl RNA y el DNA son materiales genéticos de la célula cuya extracción es útil para la medicina moderna. Actualmente existen varios métodosde extracción de RNA y DNA por separado y a costos altos. En este trabajo se describe el método UMSAgen como alternativa para laextracción simultanea de RNA total y DNA genómico para diagnósticos moleculares. MATERIAL Y MÉTODOSSe obtuvieron veinte muestras de médula ósea de pacientes con leucemia mieloide crónica. Los leucocitos fueron separados de los glóbulosrojos con tampón de lisis. Aproximadamente 3 x 106 de células fueron lisadas en guanidio y conservadas a -20 ºC hasta el momento dela extracción del RNA y DNA. Se realizaron extracciones con 3 diferentes métodos: a) El método comercial Quiagen para el RNA total, b) elmétodo clásico fenol-cloroformo para el DNA genómico y c) el método UMSAgen para extracción simultanea de RNA y DNA. RESULTADOSLa pureza del RNA total y DNA genómico extraídos por el método UMSAgen es similar a la extraída con el Kit Quiagen para el RNA y latécnica clásica para el DNA. La evaluación realizada por electroforesis en agarosa y la amplifi cación del daño molecular BCR-ABL y JAK-2V617F, por RT-PCR y PCR respectivamente, fue exitosa. CONCLUSIÓNE: método UMSAgen es una alternativa fácil y económica para la extracción de RNA total y DNA genómico en diagnóstico e investigación molecular...

INTRODUCTION The RNA and the DNA are genetic materials of the cell. The RNA/DNA extraction is necessary in modern medicine. Several RNA/DNA isolation methods exist but they are very expensive and therefore not applicable in our country. In this work, we describe the UMSAgen method as an alternative for simultaneous total RNA and genomic DNA extraction for molecular diagnosis. MATERIAL AND METHODS Twenty bone marrow samples of chronic myeloid leukemia patients were obtained. The leukocytes were separated from the erythrocytes with lyses solution; 3x106 cells were lysed in guanidio solution and conserved at -20ºC until the extraction procedure.The extraction of nucleotide acids was realized by 3 different methods: a) commercial method QuiagenTM for RNA extraction, b) classic method (phenol/chloroform) for DNA extraction and c) UMSAgen method for simultaneous RNA/DNA extraction. The two fi rst methods were used as a control test for UMSAgen.RESULTS The quality and quantity of total RNA and genomic DNA obtained by the UMSAgen method were similar to that of the QuiagenTM Kit and the classic method, respectively. The ABL-BCR and JAK-2V617F amplifi cation by RT-PCR and PCR were successful. CONCLUSIONS The UMSAgen is an easy and inexpensive altrernative method for total RNA and genomic DNA extraction in diagnostic and biomolecular research.

Texto para el curso prefacultativo 2000

CONTENIDO: Resolucion. Presentación. Biologia. Fisica. Quimica. Anatomia. Matematica moderna

Relación de parametros antropometricos y datos clinicos en eritrocitosis de altura / Relation of antropometric prameters and clinicas data in nigh altitude eritrocitosis

Pregunta de investigación:¿ Existe asociación entre la Eritrocitosis de Altura con variables antropométricas, presion arterial sistématica, pulso y saturación de oxigeno?. Objetivos: Determinar la existencia de asociación entre variables sociodemográficos y datos clínicos en la Eritrocitosis de altura. Diseño: Corte transversal. Lugar: Unidad de Diagnostico Molecular en Hematologia Paolo Belli. Población: 104 casos y 102 controles por cálculo muestral en ambos sexos y de grupo etário diverso, con distintas patologías, y que realizaron sus exámenes de laboratorio hematologícos en la Unidad mencionada. Metodos: Se analizó sangre venosa para las determinaciones de la serie roja, se llenó un cuestionario con antecedentes generales, medidas antropométicas, cuntificación de presión arterial sitémica ysaturación de oxigeno (SaO2). Se utilizó estadística descríptiva, test de significancia, test, chi2, odds ratio y regresión logística. Resultados: Se observó que existe asociación entre la enfermedad u sobrepeso dando un OR: 5.70 (IC95porciento: 3.13-10.38). El efecto del sobrepeso sobre Eritrocitosis depende del sexo con p<0.000, OR5,63 (IC95 porciento: 3.1-10.3) Edad con p<0.000 OR: 4.7 (IC95 porciento: 2.4-9.4). Saturación de oxigeno p<0.000 OR: 4.8 (IC95 porciento: 2.6-8.9), presión arterial sistolica p<0.000 OR: 4.9 (IC95 porciento:2.7-9.2) y presion arterial diastolitica con p<0.000 OR: 4.5 (IC95 porcineto: 2.4-8.5). el pulso no presenta asociacion con la enfermedad, no es modificador de efecto ni confundente, el sesgo relativo fue mayor de 78 porciento. Conclusiones: Los pacientes con eritrocitosis de Altura tiene como factor de riesgo elsobrepeso que es modificado por la edad, sexo,, saturacion de oxigeno y prsión arterial sitémica.

Producción de Solasodina a través del cultivo in vitro de tejidos de la especie Solamum marginatum / Production of solasodina to around of the cultivation in vitro of weaves of the species Solanium Marginatum

La importancia de la solasodina, un alcaloide esteroídico y sus glicósidos, es grande, ya que poseen actividades farmacológicas potencialmente útiles para mejorar la salud humana y debido a su utilización en la síntesis de esteroides. Se ha desarrollado un método de producción de solasodina a través del cultivo in vitro de tejidos provenientes de las hojas de la especie s. Marginatum L.f.. Consistió principalmente en la producción de callos con diferentes tratamientos y concentraciones hormonales, para luego ser analizados químicamente en su capacidad de producir solasodina. El principal resultado fue que dichos callos son capaces de producir un 30 por ciento más del alcaloide que la propia planta

Texto para el curso prefacultativo

Biologia. Microscopio. Sistema optico. Ocular. Sistema de iluminacion. Sistema mecanico. Funcionamiento y formacion de la imagen microscopica. La celula. Tipos de celulas. Estructura y funcion de lacelula eucariotica. Citoplasma. Membrana nuclear. Citogenetica. Nucleo. Cromatina. Cromosomas. Reproduccion celular mitosis-meiosis. Fases de la mitosis. Fisica. Unidades de medicion. Vectores. Mecanica. Trabajo energia y potencia. Sonido y optica. Hidrologia. Termodinamica. Electricidad. Quimica general y organica

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CONTENIDO: Biologia. Fisica y Quimica